《表2 1F4抗体轻重链可变区基因同源性与氨基酸序列分析》

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《F型肉毒毒素单克隆抗体的制备与鉴定》

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提取1F4细胞总RNA，经逆转录后通过特异性引物扩增出抗体轻重链可变区，琼脂糖电泳结果显示扩增目的片段均为420 bp左右，与预期的抗体轻重链可变区大小相符（图5）。扩增的目的片段连入T载体后测序，测序结果经IgBLAST比对分析后提取出抗体轻重链可变区的核苷酸序列，再经Vbase软件分析抗体轻重链可变区基因同源性与氨基酸序列。抗体可变区由FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4组成，Vbase软件分析了各框架区（FR）和互补决定区（CDR）长度（氨基酸残基数量）；而且抗体CDR3是与抗原结合最重要的区域，其氨基酸序列在3个CDR中多样性最显著，所以重点分析了CDR3的氨基酸序列。结果见表2，抗体轻链可变区基因与小鼠IGκV3-12*01序列的同源性为98.2%，轻链可变区蛋白的4个FR(FR1、FR2、FR3、FR4）长度分别为26、17、36、10个氨基酸残基，夹在4个FR之间的3个CDR(CDR、CDR2、CDR3）长度分别为6、3、9个氨基酸残基，其中CDR3氨基酸序列为QQHYSTPWT；抗体重链可变区基因与小鼠IGHV1-5*01序列的同源性为96.9%，重链可变区蛋白的4个FR(FR1、FR2、FR3、FR4）长度分别为25、17、38、11个氨基酸残基，3个CDR(CDR1、CDR2、CDR3）长度分别为8、8、12个氨基酸残基，其中CDR3氨基酸序列为TRHGYFPSWFAY。