《表5 DEGs荧光定量PCR引物序列》

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《鸭肠炎病毒感染对鸭肠道黏膜组织转录组变化分析》

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将RNA-Seq测序结果根据Q-value值越小，差异基因越显著，分别从T24和T48中选择4个DEG，根据Primer-BLAST在线软件设计4对荧光引物（表5）。取T24和T48十二指肠黏膜提取组织RNA，进行检测。每个样设置3个重复，经NanoDrop OD260 nm、OD280 nm和OD260 nm/OD230 nm检验合格，再进行RT-qPCR定量验证。反应体系：PCR Forward Primer 0.5μL、PCR Reverse Primer 0.5μL，c DNA 1μL，SYBR Premix Ex TaqⅡ5μL，ddH2O 3μL。扩增条件为：94℃3 min，95℃10 s，60℃30 s，35个循环，计算出的CT采用2-ΔΔCt法计算基因的mRNA转录水平。