《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《BNIP3介导的线粒体自噬对低氧环境下卵巢癌HO-8910PM细胞侵袭转移的影响》

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应用Trizol试剂提取已经处理48 h的细胞总RNA，对总RNA进行定量分析并逆转录成cDNA，以β-actin作为内参基因，分别检测BNIP3及LC3-Ⅱm RNA的表达量。按下述体系进行qPCR:SYBR Premix EX TaqTMⅡ12.5μL，上、下游引物各0.5μL，模板cDNA 2μL，后应用无菌双蒸水补足至25μL。PCR反应条件为95℃预变性10 min；94℃变性15 s，60℃退火30 s，共计循环40次，引物序列见表1，BNIP3及LC3-Ⅱ相对表达量以2-ΔΔCt法计算。