《表2 正交试验:棉花去泛素化酶基因GhOTUD5原核表达条件的优化》

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《棉花去泛素化酶基因GhOTUD5原核表达条件的优化》


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不同诱导条件下上清与沉淀中目的蛋白的表达结果与分析(表2)。根据极差R1可知,各因素对可溶性目的蛋白表达量影响次序为:OD600>诱导温度>IPTG终浓度>诱导时间;根据极差R2可知,各因素对不溶性目的蛋白表达量影响次序为:IPTG终浓度>诱导时间>OD600>诱导温度。正交试验最佳组合是:菌体密度OD600为0.8,诱导时间为3 h,诱导温度为28℃,诱导剂IPTG终浓度为0.7 mmol/L。在此诱导条件下,可溶的目的蛋白表达量最大,可达到13.2%。为验证最优结果的可靠性,本试验进行了3次重复,结果显示可溶性GhOTUD5的表达量均稳定占据上清总蛋白的13%左右。