《表1 sgRNA序列:去泛素化酶OTUD6A基因敲除小鼠的构建及表型初步分析》
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《去泛素化酶OTUD6A基因敲除小鼠的构建及表型初步分析》
PAM.前间区序列邻近基序
利用Cas9/sgRNA基因编辑技术,构建针对小鼠OTUD6A基因的导向gRNA,指导Cas9蛋白在CRISPR RNA(crRNA)引导序列靶标的特定位点剪切DNA双链;同时制作携带靶位点同源臂Loxp位点的供体载体(donor vector),与Cas9系统共同注射,在Cas9蛋白切开DNA链后通过同源重组将Loxp重组到靶位点上,获得F0代小鼠;后期经PCR、测序验证的阳性F0代小鼠和野生型背景小鼠交配,获得PCR及测序正确的F1代阳性小鼠。sgRNA序列见表1。
图表编号 | XD00133948200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.25 |
作者 | 王泽、张晓莉、崔春萍、张令强 |
绘制单位 | 军事科学院军事医学研究院生命组学研究所、蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京)、军事科学院军事医学研究院生命组学研究所、蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京)、军事科学院军事医学研究院生命组学研究所、蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京)、军事科学院军事医学研究院生命组学研究所、蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京) |
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