《表3 引物序列Tab 3 Primer sequences》

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《慢病毒介导的shRNA干扰大鼠施万细胞RSC96 MYH14基因的表达》

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MYH14:Myosin heavy chain 14；shRNA:Short hairpin RNA；F:Forward；R:Reverse

设计引物序列（表3），配制PCR反应体系（双蒸水9.2μL，2×Taq Plus MasterMix 10μL，上、下游引物各0.4μL），振荡混匀，短暂离心。在超净台中用无菌枪头挑取单个菌落至20μL鉴定体系中，吹打混匀，置于PCR仪中测定。将鉴定出的阳性克隆转化子接种于适量LB培养液中，37℃培养12~16 h，取适量菌液进行测序。对测序结果与目的基因序列进行比对分析，并抽提阳性克隆质粒转染细胞。