《表1 引物序列Tab.1 Primer sequences》

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《一种中药复方对小鼠脾脏淋巴细胞PD-1/PD-L1表达的影响》


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取50mg脾脏组织,采用Trizol法提取总RNA,采用超微量分光光度计测定RNA浓度,判定纯度后,反转录成cDNA,以此cDNA作为模板,进行Real-time PCR扩增,以GAPDH作为内参基因。扩增PD-1的程序如下:95℃,10min;95℃,15s;60.9℃,1 min;40cycles。扩增PD-L1的程序如下:95℃,10 min;95℃,15s;60.1℃,1min;40cycles。50μL反应体系,其中25μL 2×SYBR Green mixture,10μmol/L正向和反向引物各2μL,10μL cDNA,11μL无RNase水,混匀后,分至3管,每管15μL。引物序列见表1。