《表1 引物序列Tab.1 Primer sequences》

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《补阳还五汤调控小胶质细胞/巨噬细胞极化抑制大鼠脑缺血后炎症反应研究》


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用Trizol法提取总RNA,根据TaKaRa公司SYBR PrimeScript RT-PCR试剂盒说明书将RNA逆转录为cDNA。按照Takara SYBR Premix Ex Taq TM试剂盒进行qRT-PCR检测。反应体系如下:2×SYBRPremix Ex TaqⅡ5.0μL、10μmoL·L-1上下游引物各0.4μL、50×ROX Reference DyeⅡ0.2μL、cDNA 1.0μL、ddH2O 3.0μL。反应程序:95℃预变性30s,95℃5s,60℃30s,40个循环;95℃15s,60℃1min,95℃15s。PCR反应结束后确认扩增曲线和熔解曲线,以GAPDH为内参,采用2-ΔΔCt法分析mRNA相对表达量。PCR引物引物均由上海生工生物工程有限公司合成,序列见表1。