《表1 用于分子分析样本信息》

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《浙江九龙山发现北仑姬蛙新种群的两性异形》

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用DNA提取试剂盒（GENVIEW-AT-DNA-50，北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司）提取6个标本的肌肉组织总DNA；参考Zhang等（2018）的引物和PCR扩增条件，对样本的线粒体16S r RNA的DNA片段进行常规PCR扩增，PCR产物送生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序。用SeqMan检查测序结果，去除杂峰，保留511 bp的16S rRNA序列，用DNASP 4.0鉴别单元型、计算单元型多样性和核苷酸多样性；随后在GenBank中与已知姬蛙属物种的相应序列进行BLAST比对，确认相似物种。参考Zhang等（2018）并从GenBank下载姬蛙属物种可用16S rRNA序列数据16条和1条北方狭口蛙（Kaloula borealis）序列（表1）。用MEGA对所下载的16S rRNA序列和本实验采集到的6个标本序列进行对齐排列并截取长度一致的序列片段（486 bp），随后用pairwise uncorrected p-distance模型计算各样本间的遗传距离。