《表1 分子测序样本信息表》

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《"基于DNA条形码探究盗条蜂Anthophora plagiata(Illiger,1806)的物种界定"》

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将所有采集的标本制成针插标本以后，选取其中12头标本进行分子测序（见表1）。取标本右侧中足置于1.5ml的离心管中加无水乙醇保存，将其带回实验室后，测定其一段线粒体细胞色素C氧化酶亚型I基因序列（cytochrome oxidase subunit I，COI）。在DNA提取前，加液氮至离心管研磨样本至粉末状。本研究使用DNeasy Blood&Tissue Kit（Qiagen Gmb H，Hilden，Germany）试剂盒严格按照其说明书要求进行基因组DNA提取。COI基因所用引物为C1-J1514和C1-N2194[15-16]；聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reac‐tion，PCR）体系为30ul体系（COI）:10μl dd H2O、15μl Premix TaqTM（LA TaqTMversion2.0plus dye）(Ta Ka Ra）、1ul单向引物（10μM）、3μl DNA模板；反应体系如下：94℃解链2分钟、45℃退火40秒、72℃延伸1分钟（4个循环）、94℃解链40秒、50℃退火40秒、72℃1分钟（35循环），72℃终延伸6分钟。获取PCR产物后，经琼脂糖凝胶电泳（浓度1%）观察后，将条带清晰的PCR原液送至公司双向测序（测序仪规格：Big Dye v3.1，ABI 3730xl DNA分析仪）。