《表1 qRT-PCR引物序列》
金柑果皮和果肉组织RNA的提取采用多糖多酚样本RNA提取试剂盒(北京华越洋)完成,使用Prime Script RT reagent Kit with gDNA Eraser试剂盒(TaKaRa)进行第1链cDNA合成。基因表达分析采用实时荧光定量PCR(Real-time qPCR)方法,在CFX96 touch PCR仪(美国Bio-Rad公司)上完成。柑橘SPS引物设计利用NCBI在线引物比对程序PrimerBlast完成,以β-actin(Cs1g05000)作为参考基因,引物(表1)由上海生工合成。基因扩增体系为:5μL 2×TB Green Premix Ex Taq II(TaKaRa),0.4μL正向和反向引物(10μmol·L-1),0.1μg cDNA并补充ddH2O至10μL。PCR反应程序如下:50℃2 min,95℃10 min;95℃15 s,60℃1 min(40个循环)。每个样品的cDNA扩增反应进行3个独立重复。基因的表达量采用2-ΔΔct方法计算。
图表编号 | XD00142420700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.02.25 |
作者 | 魏清江、马张正、勒思、雷常玉、马巧利、辜青青 |
绘制单位 | 江西农业大学农学院、江西农业大学农学院、江西农业大学农学院、江西农业大学农学院、江西农业大学农学院、江西农业大学农学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |