《表1 引物序列：射干乙醇提取物抗IBV活性及调控IFN-β表达量作用》

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《射干乙醇提取物抗IBV活性及调控IFN-β表达量作用》

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IBV感染H1299细胞2 h后，提取物处理被IBV感染的H1299细胞，设置病毒加药组、病毒对照组、乙醇对照组、空白对照组，继续培养16～24 h，收获细胞。按照Trizol试剂盒说明书提取总RNA。RT-qPCR实验步骤参照荧光定量试剂盒说明书，反应条件：94℃预变性30 s，94℃变性5 s，60℃退火30 s，40个循环。所用引物序列见表1。Western blot实验步骤：将处理好的细胞样品经SDS-PAGE电泳后，转至聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上，经5%脱脂乳封闭，以IBV-N上清为一抗，羊抗兔HRP-IgG(1∶1000）为二抗，通过底物显色进行鉴定。