《表1 引物序列：蓬莪术乙醇提取物的抗IBV作用研究》

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《蓬莪术乙醇提取物的抗IBV作用研究》

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IBV感染H1299细胞2 h后，提取物处理被感染的H1299细胞，继续培养16～24 h，收获细胞。按照Trizol试剂盒说明书提取总RNA，超微量核酸蛋白检测仪测定RNA浓度，-20℃保存。RT-qPCR检测步骤：（1) cDNA合成：按照荧光定量反转录试剂盒说明书合成cDNA，-20℃保存。（2) qPCR反应：以cDNA为模板，94℃预变性30 s，94℃变性5 s、60℃退火30 s、72℃延伸1 min，共40个循环。所用引物序列见表1。