《表2 引物序列:几种植物多糖的结构特征与预防肥胖活性研究》
(1)常规指标检测:每周记录体重变化,实验结束后,准确称量皮下、肾周、附睾脂肪重量并计算总脂肪湿重。(2)组织病理学观察:断颈处死后,剖取小鼠肝脏和脂肪组织,置于4%多聚甲醛溶液,固定48h,常规取材,脱水,石蜡包埋,制片(4μm厚),HE染色,显微镜观察切片组织病理学特征,于200倍视野下,使用Image-Pro Plus 6.0软件,统计皮下脂肪细胞直径。(3)血清学指标检测:8 w实验结束,将所有小鼠禁食12 h,摘眼球采血处死。血样经过离心处理(5 000 r/min、4℃、15min),分离血清样本,全自动生化分析仪测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平。(4)q PCR检测:Trizol试剂抽提小鼠肝脏RNA[14],反转录制备c DNA第一链,采用10μL体系进行荧光定量,Eva Green 2X q PCR Master Mix-No Dye 5μL,c DNA模板1μL,上游引物(10nmol/L)0.3μL,下游引物(10 nmol/L)0.3μL,dd H2O补充至10μL。按照梯度程序:95℃10 min、95℃15 s、60℃60 s,循环45次。以GAPDH为内参基因,采用2-(ΔΔCT)法[15]对各基因的表达水平进行分析(表2)。
图表编号 | XD00127685800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.12.28 |
作者 | 刘海燕、任发政、李景明、侯彩云 |
绘制单位 | 北京食品营养与人类健康高精尖创新中心、中国农业大学食品科学与营养工程学院、北京食品营养与人类健康高精尖创新中心、中国农业大学食品科学与营养工程学院、中国农业大学食品科学与营养工程学院、食品质量安全北京实验室、中国农业大学食品科学与营养工程学院、食品质量安全北京实验室、北京食品营养与人类健康高精尖创新中心、中国农业大学食品科学与营养工程学院、中国农业大学食品科学与营养工程学院、食品质量安全北京实验室 |
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