《表5 引物序列信息：天津地区几种黄瓜真菌、细菌及病毒性病害研究》

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《天津地区几种黄瓜真菌、细菌及病毒性病害研究》

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使用TRIZOL提取总RNA，并测定RNA纯度和浓度。引物序列见表5，根据表中序列进行引物的合成，合成工作由华大基因公司完成。按如下操作进行cDNA的合成:（1）PCR管中加入1μL总RNA，1μL引物，65℃温浴7 min，冰浴5 min，瞬离；（2）再向PCR管中加入1μL的RT，4μL的5×缓冲液，总反应体系为20μL，其他用ddH2O补齐；（3）反应参数:37℃15 min；85℃5 s；4℃冷却[7]。产物于-20℃冷冻保存。合成cDNA后，PCR过程参照1.2.3。PCR扩增完成后进行电泳检测，对凝胶成像进行拍照分析。