《表1 引物信息：北京地区犬冠状病毒的分离鉴定及遗传进化分析》

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《北京地区犬冠状病毒的分离鉴定及遗传进化分析》

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根据Pratelli的报道[13]，针对M基因合成两对引物CCoVⅠ-F/CCoVⅠ-R和CCoVⅡ-F/CCoVⅡ-R，用于CCoV基因型的鉴定（引物信息见表1）。提取分离病毒的核酸，并进行反转录获得cDNA，RT-PCR法进行基因型鉴定。反应体系如下:2×PCRMix 10L；CCo VⅠ-F/CCo VⅠ-R和CCoVⅡ-F/CCoVⅡ-R各1.0L，模板2L；ddH2O加至20L。反应条件为:95℃、5 min；95℃、30 s，48℃、30 s，72℃、30 s，35个循环；72℃10 min。并设置阴性对照和阳性对照。