《表1 qRT-PCR反应的引物参数》

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《蝴蝶兰AP2/ERF家族基因的克隆及在低温下表达特性分析》

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根据AP2/ERF基因序列设计4对特异性qRT-PCR引物，以Actin为内参基因，参照SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ（TaKaRa）说明书，用qRT-PCR方法检测AP2/ERF基因在两品种蝴蝶兰不同低温处理时间下的表达量。每个样品3个重复，蒸馏水为阴性对照，反应体系20μL，反应程序：95℃预变性30 s，95℃变性15 s，58℃退火15 s，72℃延伸20 s，共40个循环，结果按照相对表达量2-??Ct计算。qRT-PCR引物及参数见表1。