《表1 PCR扩增和测序引物》

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《83例苯丙酮尿症患者pah基因大片段缺失的检测》

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在ABI 9700PCR（美国Applied Biosystems公司）仪上进行聚合酶链式反应，采用20μL的PCR总反应体系，其中2*Master Mix（TIANGEN）10μL，上下游引物（表1）各0.4μL，DNA模板1μL，ddH2O 8.2μL。PCR反应条件:95℃预变性5min，95℃15s，55℃15s，72℃30s（30次循环），72℃10min。用1%琼脂糖凝胶电泳观察PCR产物片段的大小，确定有目的片段并且同引物设计的目的片段大小一致后在ABI 3730测序仪上进行测序，测序结果的峰图以及序列比对分别采用Chromas Pro 2.1.3和Vector NTI Explorer进行。