《表1 人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品PCR扩增及测序引物[6]》

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《人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品的建立》

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初筛使用上海科华生物工程股份有限公司的人细小病毒B19核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法），确认使用In-house巢式PCR扩增及测序方法，引物序列见表1[6]。巢式PCR第一轮反应条件为：第一步94℃热启动2 min；第二步94℃20 s，55℃30 s，72℃45 s，40个循环；第三步72℃7min。第二轮反应条件将循环过程中退火温度升至58℃。