《表1 目标菌特异性引物及探针》

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《基于PacBio SMRT技术的婴幼儿配方奶粉微生物安全性评价》

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以1.3.2节中提取的DNA为模板进行PCR扩增，扩增体系为：2×ddPCR Super鄄mix for probes 10μL，模板DNA 2μL，上、下游引物（10μmol/L）各1.2μL，探针（10μmol/L)0.4μL，加ddH2O补充至20μL。将充分混匀的20μL反应体系转移至微滴发生卡中，并向微滴发生卡中加入70μL Droplet generation oil，将微滴发生卡置于微滴发生器中反应。随后将生成的微滴转移至96孔板，封膜后进行PCR扩增反应。扩增条件为：95℃10 min；95℃30 s，60℃40 s，40个循环；98℃10 min，4℃保存。PCR反应结束后将96孔板放入QX200 Droplet Reader进行检测，具体引物探针序列如表1所示。