《表3 引物探针信息:空肠弯曲菌快速检测试剂盒研制及AOAC验证》
针对空肠弯曲菌特异hip O基因设计特异的引物探针。经NCBI BLAST后,确保不与其它菌种发生交叉反应。内部扩增对照(Internal Amplification Control,IAC)DNA为鱼败血病病毒的一段基因(accession no.X66134),前后分别添加hip O上下游引物,因此IAC与hip O共用引物,但探针不同,空肠弯曲菌检测探针用FAM标记,IAC检测探针用VIC标记(表3)。IAC DNA共136 bp:GCAAAGAAGCAG CATAAATAGGATCGACCAGCTCAACTCAGGTGT CCTCATGAATTTGAAGACATAAACAAGGGACTG GTCTCCGTCCCAACCAAGATCATCCATCTCCCTT CCAATAACTTCAATGCTATAACTA,黑色加下划线部分是鱼败血病病毒基因的一段序列。IAC DNA由上海辉睿生物科技有限公司合成。将IAC DNA克隆至p GH载体(长度3 053 bp)上,并转移至包含甲基化酶的大肠杆菌中,采用质粒提取试剂盒提取质粒DNA。DNA质量浓度计算公式同1.2.1.3节,其中n代表质粒长度(3 053 bp)。
图表编号 | XD00228741200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.30 |
作者 | 申进玲、蒋原、赵丽娜、薛峰、杨捷琳、祝长青、邵景东、韩伟 |
绘制单位 | 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、南京农业大学动物医学院、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、南京晓庄学院、张家港海关综合技术中心、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心 |
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