《表1 DVⅠ、DVⅡ、DVⅢ和DVⅣ特异性引物探针序列》

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分别提取DV I阳性血清、DVⅡ阳性血清、DVⅢ阳性血清、DVⅣ阳性血清核酸,分别对DV I 7对引物组合、DVⅡ13对引物组合、DVⅢ9对引物组合和DVⅣ的5对引物组合进行RT-RAA扩增,根据对阳性样本检测中荧光值的强弱优选出引物探针,如表1所示。测定在50μL反应体系中,当上下游引物工作浓度为10μmol/L加入2μL,探针工作浓度为10μmol/L加入0.6μL,扩增温度为39℃,能获得最佳荧光吸收信号(见表1)。