《医学分子生物学实验》

绪论1

第一部分基因组脱氧核糖核酸（DNA）操作技术6

实验一 真核细胞染色体DNA的分离制备6

实验二 DNA样品的检测10

实验三 多聚酶链式反应（PCR）15

实验四 Southern印迹杂交18

实验五 PCR-RFLP技术分析基因的多态性23

第二部分质粒脱氧核糖核酸（DNA）操作技术26

实验六 碱变性法少量制备质粒DNA26

实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备与重组质粒转化32

实验八 DNA的限制性酶切37

实验九 琼脂糖凝胶中DNA片段的分离和回收40

实验十 质粒DNA的连接和转化43

第三部分核糖核酸（RNA）操作技术47

实验十一 真核细胞RNA的制备47

实验十二 逆转录PCR50

实验十三 Northern印迹杂交53

实验十四 real-time RT-PCR检测基因的表达丰度56

第四部分蛋白质操作技术60

实验十五 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测60

实验十六 蛋白质的定量分析66

实验十七 Western印迹杂交70

第五部分分子生物学最新技术进展77

一、第二代DNA测序技术77

二、病毒系统的原理及应用82

三、CRISPR/Cas9技术的原理及应用85

第六部分附录88

附录1常用DNA分子量标准88

附录2常用蛋白质分子量标准90

附录3实验室常用试剂、缓冲液的配制方法92

附录4核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法97

附录5蛋白质电泳及蛋白质杂交相关试剂、缓冲液的配制方法99

附录6实验室常用培养基的配制方法105

参考文献108

参考网站110