《医学微生物实验学》

第一部分医学微生物学实验1

第一实验细菌的人工培养法1

实验1 基础培养基的制备1

实验2 接种环（针）的用法2

实验3 细菌的分离及接种法4

实验4 细菌生长及代谢产物的观察6

〔附录〕常用培养基的配制8

第二实验细菌形态学检查法12

实验5 显微镜的使用12

实验6 细菌的基本形态和特殊结构的观察13

实验7 不染色标本检查法（悬滴法）13

实验8 细菌涂片的制作及革兰氏染色法13

实验9 痰标本涂片的制作及抗酸染色法14

实验10 测微器及细菌菌落计算器的使用15

〔附录〕17

第三实验理化及生物因素对细菌的影响20

实验11 常用消毒、灭菌、除菌器的使用20

实验12 细菌的药物敏感性试验24

〔附录〕25

实验13 噬菌体的分离及其特性25

第四实验细菌的遗传与变异27

实验14 各种变异现象的观察（示教）27

实验15 R质粒的传递试验28

实验16 质粒DNA的大肠杆菌转化试验28

实验17 细菌质粒的提取与电泳29

第五实验动物实验技术32

实验18 动物的实验感染法32

实验19 实验动物的采血法33

第六实验化脓性球菌35

实验20 化脓性球菌的分离鉴定35

实验21 淋球菌的检查37

实验22 抗链球菌溶血素“O”试验（ASO试验）38

实验23 AS“O”胶乳凝集试验39

第七实验肠道杆菌41

实验24 粪便标本病原菌的分离与鉴定41

实验25 肥达氏试验43

实验26 鲎试验44

〔附录〕45

第八实验厌氧性细菌、棒状杆菌属、分枝杆菌属48

实验27 厌氧性细菌48

实验28 棒状杆菌49

实验29 分枝杆菌50

〔附录〕52

第九实验其他微生物53

实验30 立克次氏体53

实验31 衣原体54

实验32 支原体55

实验33 螺旋体56

实验34 真菌与放线菌59

〔附录〕61

第十实验病毒培养法63

实验35 病毒的动物接种法63

实验36 鸡胚培养法64

实验37 病毒组织培养法66

实验38 水泡性口炎病毒在细胞上的感染性测定68

〔附录〕细胞培养常用试验及培养液70

第十一实验病毒的分离与鉴定72

实验39 流感病毒的分离与鉴定72

第十二实验病毒的快速诊断76

实验40 ELISA间接法检测副流感病毒（PFV）血清IgM抗体76

实验41 ELISA夹心法检测呼吸道合胞病毒（RSV）抗原77

实验42 乙型肝炎病毒HBsAg检测法78

实验43 斑点杂交法检测HBV—DNA78

第二部分医学免疫学实验80

第一实验天然抵抗力的测试80

实验1 血脑屏障的作用（示教）80

实验2 中性粒细胞吞噬功能试验80

实验3 巨噬细胞吞噬功能测定81

实验4 硝基蓝四氮唑（NBT）还原试验82

实验5 溶菌酶的测定82

第二实验抗原与免疫血清的制备84

实验6 伤寒杆菌免疫血清的制备84

实验7 抗红细胞抗体（溶血素）的制备85

实验8 IgG的提取、纯化及兔抗人IgG免疫血清的制备85

第三实验凝集反应87

实验9 玻片凝集试验87

实验10 试管凝集试验87

实验11 间接凝集试验——胶乳凝集抑制试验（妊娠试验）88

实验12 SPA菌体协同凝集试验89

第四实验沉淀反应90

实验13 双向琼脂扩散试验90

实验14 对流免疫电泳90

实验15 免疫电泳91

实验16 单向琼脂扩散——测定人血清中IgG含量92

第五实验补体参与的反应及血清补体含量的测定93

实验17 溶血反应93

实验18 血清总补体量的测定（CH50测定）93

实验19 补体C3的测定94

实验20 补体结合反应96

第六实验免疫标记技术98

实验21 酶联免疫吸附试验HRP—SPA—ELISA法检测抗DNA抗体（改良法）98

实验22 荧光抗体法检测人外周血中的B淋巴细胞（示教）98

第七实验抗体生成细胞的检测100

实验23 溶血空斑试验100

实验24 溶血分光光度测定法101

第八实验免疫细胞功能体外检测102

实验25 E花环形成试验102

〔附录〕EA及EAC花环形成试验（示教）103

实验26 淋巴细胞转化试验（示教）104

实验27 单克隆抗体检测T淋巴细胞亚群试验——微量细胞毒法105

实验28 人外周血中NK细胞活性的检测106

第三部分开放实验室及实验设计108

第一实验实验设计108

实验1 临床检测方案的设计108

实验2 新方法、新技术的设计109

〔附录〕临床病例109

第二实验 暴发流行的实验室工作111

附录112

一、常用指示剂112

1．0.5％酚红水溶液112

2．1.6％溴甲酚紫酒精溶液112

3．0.2％甲基红水溶液112

4．0.5％美兰水溶液112

二、细菌生化反应试剂112

1VP试验试剂112

2 吲哚试剂112

3 甲基红试剂112

4 氧化酶试验试剂112

三、缓冲液112

1pH8.60.05M巴比妥缓冲液113

2 pH7.0～7.2pBS（含Ca2+、Mg2+）113

3 M/15磷酸缓冲液113

四、酶联免疫吸附试验（ELISA）常用液113

五、抗凝剂、血球保存液及染液114

13.8％构橼酸钠抗凝剂114

2 1％肝素114

3 阿氏（Alsever）血球保存液114

4 0.5％台盼兰（锥蓝、Trypanblue）114

5 瑞氏——姬姆萨复合染色液114

六、器材处理与消毒灭菌114