《生物化学与分子生物学实验技术教程》

第一篇生物化学与分子生物学实验基础知识2

第一章实验室管理——实验达到最佳效果的前提2

第一节 实验室规则2

第二节 实验用品的清洗3

第三节 实验样品的保存5

第四节 常规实验仪器的使用7

第五节 实验数据的常用处理方法19

第六节 实验报告的撰写与要求20

第二章生物大分子制备技术——如何分离纯化生物大分子22

第一节 前处理和细胞分离23

第二节 分离与纯化27

第三节 提纯后的处理34

第三章分光光度技术——测定物质的吸收光谱38

第一节 分光光度技术的基本原理38

第二节 分光光度计的基本构造39

第三节 常用分光光度计的使用方法41

第四节 分光光度法在生物化学和分子生物学实验技术中的应用42

第四章电泳技术——有效分离带电粒子45

第一节 电泳技术的形成和发展45

第二节 基本原理和影响泳动率的因素46

第三节 电泳技术的分类48

第五章离心技术——利用离心场沉降高分子53

第一节 离心技术的基本原理53

第二节 离心机的类型、操作流程和操作注意事项54

第三节 制备性超速离心的分离方法56

第六章层析技术——分开混合物中的各组分58

第一节 层析技术概述58

第二节 层析技术的基本原理61

第三节 吸附层析61

第四节 凝胶层析64

第五节 离子交换层析68

第七章分子杂交技术——探查核酸序列73

第一节 核酸分子杂交的基本原理73

第二节 核酸探针75

第三节 常见核酸分子的杂交类型78

第八章聚合酶链式反应（PCR）技术——微量DNA的体外扩增81

第一节 PCR技术的基本理论81

第二节 PCR技术的发展和应用85

第三节 PCR的衍生技术86

第四节 样品的处理与注意事项88

第九章 核酸的分离纯化技术——离心技术的应用92

第二篇生物化学与分子生物学实验96

实验一 蛋白质的沉淀、变性反应96

实验二 紫外吸收法测定蛋白质含量99

实验三 血清甘油三酯含量测定102

实验四 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定（赖氏法）105

实验五 血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法）109

实验六 血清高密度脂蛋白——胆固醇的含量测定112

实验七 激素对血糖浓度变化的影响115

实验八 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）测定蛋白质的相对分子量118

实验九 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳122

实验十 DNA的纯度、浓度的测定及DNA琼脂糖凝胶电泳技术126

实验十一 DNA的限制性内切酶的电泳分析和酶切图谱分析130

实验十二 质粒DNA的大量制备与纯化137

实验十三 含重组质粒的细菌菌落的鉴定141

实验十四 凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量144

实验十五 Southern杂交150

实验十六 Northern杂交154

实验十七 聚合酶链反应体外扩增DNA（PCR）157

实验十八 TRNzol法提取RNA162

实验十九 动物肝脏DNA的提取及含量测定165

参考文献169