《生物化学实验技术教程》求取 ⇩

实验部分1

一、蛋白质分子量和等电点的测定1

实验一（1）用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量1

实验一（2）用凝胶等电聚焦法测定蛋白质等电点8

二、蛋白质N-末端的测定22

实验二（1）用DNP-氨基酸聚酰胺薄膜层析法测定胰岛素N-末端23

实验二（2）用DNS-氨基酸聚酰胺薄膜层析法测定胰岛素N-末端30

附聚酰胺薄膜的制备38

三、异常血红蛋白分子的检测和分析40

实验三（1）用混合淀粉凝胶电泳法检测异常血红蛋白45

实验三（2）用虹吸式淀粉板电泳法分离纯化异常血红蛋白50

实验三（3）用肽链解离试验分析异常血红蛋白亚基特征54

实验三（4）用种间分子杂交法鉴定和分析异常血红蛋白亚基的异常58

四、蛋白质的亲和层析68

实验四（1）用分离纯化巯基蛋白的亲和层析法提纯巯基酶70

实验四（2）亲和层析洗脱流出液中巯基酶的活力测定78

五、蛋白质的放射性同位素标记87

实验五氯胺T法碘标记蛋白质88

六、RNA碱基组成分析92

实验六（1）RNA的碱水解93

实验六（2）单核苷酸的离子交换树脂柱层析分离96

实验六（3）单核苷酸的鉴定及RNA碱基组成分析104

七、DNA的（G＋C）％测定110

实验七（1）DNA的酶水解111

实验七（2）脱氧单核苷酸的纸电泳分离及（G＋C）％测定113

八、枯草杆菌pUB110质粒DNA的提取和若干分子特性的鉴定121

实验八（1）pUB110质粒DNA的提取122

实验八（2）pUB110质粒DNA的纯化127

实验八（3）pUB110质粒DNA制品的纯度鉴定和限制性内切酶EcoRI的酶切132

实验八（4）pUB110质粒DNA分子的电子显微镜观察（示范实验）139

九、大肠杆菌ColEl质粒DNA的快速提取147

实验九（1）快速酚法149

实验九（2）碱性SDS法附酚重蒸法166

十、从鸡蛋壳膜中制备溶菌酶结晶168

实验十（1）溶菌酶的提取、纯化和结晶169

实验十（2）溶菌酶纯化过程中各步骤的分析测定177

十一、酸性磷酸酯酶的动力学性质的分析183

实验十一（1）进程曲线的制作和初速度的测定184

实验十一（2）pH～活性曲线的制作和酸碱稳定性试验187

实验十一（3）温度～活性曲线的制作和热稳定性试验192

实验十一（4）米氏常数（Km）和最大反应速度（Vm）的测定196

实验十一（5）氟化钠及磷酸盐的抑制作用——抑制类型的判断和抑制剂常数（Ki）的测定202

十二、酶的固定化与菌体细胞的固定化技术210

实验十二（1）5′-磷酸二酯酶的固定化211

实验十二（2）产α-半乳糖苷酶菌体细胞的固定化217

十三、正交试验法在实验条件选择中的应用——考马斯亮蓝染色测定蛋白质浓度的条件选择225

实验十三考马斯亮蓝染色测定蛋白质浓度的实验条件选择226

附录部分234

一、常用仪器的使用方法234

二、生物化学实验用缓冲液的配制方法240

三、常用数据253