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第一章显微技术1

一、显微镜的种类和特点1

（一）明视野光学显微镜1

实验一明视野显微镜的使用3

（二）其它光学显微镜5

实验二暗视野显微镜的使用5

实验三 相差显微镜的使用6

（三）电子显微镜7

二，显微摄影9

实验四显微摄影和菌落摄影11

第二章微生物基本形态及其观察14

一，细菌14

实验五细菌的形态观察19

二、放线菌22

实验六放线菌的形态观察24

三、唑菌体24

实验七噬菌体的分离与纯化26

四、酵母菌27

实验八酵母菌细胞形态的观察32

实验九 酵母菌巨大菌落的观察33

五、小型丝状真菌（霉菌）33

一、藻状菌（主要指根、毛霉）34

实验十根、毛霉的形态观察36

二、曲霉36

三、青霉38

实验十一曲霉、青霉的形态观察38

四、其它霉菌39

六、食用真菌40

实验十二平菇的瓶栽42

第三章微生物细胞一般结构与特殊结构的观察43

一、染色技术43

（一）染色的基本原理43

（二）染料43

实验十三革兰氏鉴别染色法46

二、细胞内部结构成分的观察50

实验十四细胞壁的制备及观察50

实验十五 细胞荚膜的观察52

实验十六 结菌鞭毛的观察53

实验十七 微生物结胞核的观察54

实验十八 异染颗粒的观察56

实验十九 酵母细胞内脂肪和肝糖颗粒的观察57

实验二十 酵母液泡和线粒体的提取57

三、芽孢、子囊孢子和假菌丝的观察59

（一）芽孢59

实验二十一细菌芽胞形成及发芽的观察62

（二）酵母子囊孢子63

实验二十二酵母子囊孢子的形成及观察70

（三）酵母假菌丝71

实验二十三酵母假菌丝的观察72

第四章微生物纯培养技术72

一、消毒与灭菌72

（一）热杀菌72

（二）化学消毒剂75

（三）紫外线和射线75

（四）接种室的空气灭菌76

（五）超膜过滤77

实验二十四微孔膜滤器的使用79

二、培养基和培养基制备80

（一）培养基80

（二）培养基成分的说明80

（三）培养基的制备83

三、分离、接种和培养技术84

实验二十五试管倾倒培养皿分离法84

实验二十六 平皿划线分离法85

实验二十七 稀释分离平皿菌落计数87

（二）接种90

实验二十八接种技术90

实验二十九 小型连续发酵试验93

实验三十 无氧罐分离培养厌氧微生物95

第五章环境因素对微生物生长与发酵的影响96

一、温度96

实验三十一酵母营养细胞致死时间的测定98

二、水分与渗透压98

实验三十二培养基中糖和盐浓度对微生物生长的影响100

三、氧气和氧化还原电位100

实验三十三微生物生长对氧的要求103

实验三十四 培养液氧化还原值（rH）的测定103

四、pH104

实验三十五pH对微生物的影响106

五、重金属和一些化合物对微生物的抑制作用106

实验三十六滤纸片法测定重金属对微生物的影响106

六、表面张力107

实验三十七表面张力对微生物的影响107

第六章微生物的生理与发酵试验108

一、微生物对碳源的利用108

实验三十八细菌对糖、醇及糖苷的利用109

实验三十九 酵母对糖类的发酵110

二、微生物对氮源的利用110

实验四十细菌对硝酸盐的还原作用111

实验四十一 酵母对氮素源的利用112

三、细菌鉴定中的某些特殊的生理试验112

实验四十二对淀粉的水解112

实验四十三 V、P、反应（乙酰甲基甲醇试验）113

实验四十四 硫化氢的生成114

实验四十五 吲哚试验114

实验四十六 过氧化氢酶的产生115

实验四十七 明胶液化试验116

实验四十八 石蕊牛乳试验116

实验四十九 甲基红试验117

实验五十 乙醇的氧化117

实验五十一 乙酸的氧化118

实验五十二 脲酶的测定118

四、常见常用细菌的分离和检测119

实验五十三枯草杆菌119

实验五十四 醋酸细菌120

实验五十五 乳酸菌121

实验五十六 德氏乳酸杆菌（actobacillus delbrueckil）123

实验五十七 丙酸细菌（propionibacterium）124

实验五十八 丁酸细菌126

实验五十九 发酵法酿制食醋127

五、酵母应用持性的测定128

实验六十酵母发酵力的测定129

实验六十一 压榨酵母发酵的测定130

实验六十二 面包酵母发面力的测定131

实验六十三 酵母忍耐酒精浓度的测定132

实验六十四 酵母抵抗防腐剂能力的测定133

实验六十五 细菌液化型淀粉酶定长及生定测133

附：液化型淀粉酶活力的测定方法（部颁标准）134

实验六十六曲霉的葡萄糖淀粉生长及测定135

附：糖化型淀粉酶活力的测定方法（部颁标准）136

实验六十七米曲霉的蛋白酶生成及测定（部颁标准）138

附：蛋白酶的活力测定（部颁标准）138

实验六十八乳酸发酵及测定141

实验六十九 乳酸菌饮料142

实验七十 葡萄酒发酵143

六、固定化细胞及其发酵工业上的应用143

实验七十一固定化生长酵母细胞连续生产酒精146

附：固定化细胞数量的测定147

八、防霉剂147

实验七十二防霉剂的选用148

第七章发酵过程中及发酵食品中微生物的检测149

一、检查微生物生长、大小与数量的方法149

实验七十三酵母细胞数的测定150

实验七十四 酵母细胞大小的测定151

实验七十五 细菌生长曲线的测定152

实验七十六 丝状真菌生长速率的测定153

二、发酵工业中常见微生物种类及其概测155

（一）发酵工业中常见微生物种类155

（二）发酵工业中常见微生物类属检素表156

（三）发酵工业中常见微生物类别的概测159

三、发酵用水和发酵过程微生物数量的检测164

（一）发酵用水微生物数量的测定164

实验七十七水中细菌数的测定164

实验七十八 水中大肠菌群数量的测定165

实验七十九 水中大肠杆菌数量的测定169

实验八十 大肠杆菌的简易检出法170

实验八十一 固态法酒醅中微生物量的测定171

实验八十二 固态发酵浆水厌氧微生物的分离171

第八章选种和育种173

一、选种173

（一）采样173

（二）增殖培养173

（三）纯种分离174

（四）筛选174

（五）毒性试验174

实验八十三葡萄酒酵母的筛选175

实验八十四 利用碱法纸浆废液微生物的分离175

实验八十五 发酵废液COD的测定176

实验八十六 生产选种177

二、诱变育种177

（一）诱变剂和诱变处理177

（二）诱变育种步骤181

实验八十七紫外线的诱变育种182

实验八十八 亚硝基胍诱变曲霉菌（黑曲霉、米曲霉）183

实验八十九 抗结构类似物菌株的筛选184

三、营养缺陷型的选育185

（一）诱变方法185

（二）淘汰野生型185

（三）检出缺陷型186

（四）营养缺陷型生长谱的确定186

实验九十营养缺陷型的筛选189

实验九十一 酵母呼吸缺陷型的筛选189

四、基因重组育种190

实验九十二细菌的杂交191

五、原生质体融合育种192

（一）原生质体融合育种的特点192

（二）原生质体融合育种步骤196

（三）原生质体融合育种的要点196

实验九十三细菌原生质体的制备201

实验九十四 酵母原生质体的制备202

实验九十五 原生质体的融合203

第九章菌种保藏技术203

一、斜面传代保藏204

二、液体石蜡保藏206

三、无有机养分在液相中保藏208

（一）蒸馏水保藏208

（二）食盐水保藏208

（三）磷酸盐缓冲液保藏208

四、载体保藏209

五、真空干燥保藏209

（一）真空冷冻干燥保藏209

（二）L—干燥保藏210

六、冷冻保藏210

实验九十六快速砂土管菌种保藏211

第十章微生物实验室的设计211

一、工业微生物实验室范围与基本要求212

二、实验室的仪器设备212

（一）常用玻璃仪器与设备212

三、实验室大小及布局217

第十一章实验室常见常用的一些单元操作技术220

一、搅拌和振荡220

（一）搅拌器的类型220

（二）？管和密封221

（三）电动机221

（四）振荡222

二、气体的计量和导入222

三、加热和冷却223

（一）加热223

（二）冷凝器224

（三）冷却剂225

四、减压操作226

（一）真空的产生226

（二）真空的测量228

（三）真空操作229

五、干燥229

（一）气体230

（二）液体231

（三）固体231

六、过滤和离心232

七、简单蒸馏235

八、纸层析236

九、溶液的脱色238

十、薄层层析239

十一、密度的测定241

十二、折光率测定241

十三、比旋光度242

附录244

一、实验室安全及防护知识244

（一）实验室安全知识244

（二）实验室灭火法245

（三）实验室急救245

二、实验室常识246

三、玻璃仪器的洗涤和各种洗液的配制法248

四、缓冲溶液249

五、氨基酸的一些物理常数256

六、指示剂258

七、冷剂却259

八、硫酸铵饱和度的常用表260

九、试剂的配制及一些常用数据表261

十、一些常用单位267

十一、附表269

1、蔗糖液比重表（17.5）269

2、蔗糖液（比重巴林示度）温度更正表270

3、Gay Lussac氏酒精计表（15℃为标准）271

4、测定糖度读取的糖度更正为糖度计的20℃时的温度更正表274

5、柠檬酸溶液比重表（15℃）275

6、葡萄糖溶液比重表（17.5℃）275

7、食盐溶液比重表（15℃）276

8、食盐溶液比重表（20℃/4℃）276