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目 录1

第一章酶的一般知识1

第一节酶是催化剂1

第二节酶的分子组成1

第三节酶作用的特异性1

第四节酶的分类2

第五节酶可作为分析试剂2

第二章临床酶学分析方法的动力学基础4

第一节单底物反应动力学4

一、单底物动力学方程的导出及适用条件4

二、动力学参数的意义及其求取6

第二节多底物反应动力学9

一、酶促反应按底物级数的分类9

二、多底物反应动力学的表示法及分类10

三、多底物反应动力学参数Km及Vm的求取12

第三节影响酶促反应的因素15

一、酶浓度的影响15

二、底物浓度的影响16

三、产物的影响16

四、pH的影响17

五、温度的影响20

六、抑制剂的影响21

七、激活剂的影响28

第三章临床酶学分析法的基本原理29

第一节测定酶浓度的方法及检测技术29

一、测活法29

二、测蛋白法33

第二节用酶作试剂测定底物、辅酶、激动剂、抑制剂的方法及技术33

一、总变化量法33

二、动力学法34

第三节酶活性测定方法中底物浓度、指示酶、辅助酶加入量的确定34

一、底物的选择及浓度的确定35

二、偶联法测定酶活性方法中指示酶及辅助酶加入量的确定39

一、单酶反应定量法酶量的确定41

第四节用酶法测定底物时酶试剂加入量的确定41

二、指示酶反应偶联定量法酶量的确定42

第五节影响酶学分析法的条件选择及控制44

一、温度44

二、pH与缓冲剂45

三、效应物45

四、样品量45

第六节酶法自动分析45

一、概述45

二、自动化分析的原理46

三、临床自动化仪器(简介)48

一、一般性质50

二、测定方法50

第四章临床常用酶的性质及检测方法50

第一节谷草转氨酶(GOT,E.C.2.6.1.1.)50

第二节谷丙转氨酶(GPT,E.C.2.6.1.2)51

一、一般性质51

二、测定方法51

第三节 碱性磷酸酶(ALP,AKP,E.C.3.1.3.1)51

一、一般性质51

二、测定方法52

第四节酸性磷酸酶(ACP,E.C.3.3.1.2)52

一、一般性质52

二、测定方法52

二、测定方法53

第五节肌酸激酶(CK,E.C.2.7.3.2)53

一、一般性质53

第六节葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6PDH,E.C.1.1.1.4.9)54

一、一般性质54

二、测定方法54

第七节α-淀粉酶(AMY,E.C.3.2.1.1)55

一、一般性质55

二、测定方法55

第八节乳酸脱氢酶(LDH,E.C.1.1.1.27)56

一、一般性质56

二、测定方法56

一、一般性质57

第十节γ-谷氨酰转移酶(?-GT,E.C.2.3.2.2)57

二、测定方法57

一、一般性质57

第九节α-羟丁酸脱氢酶(HBDH,E.C.1.1.1.27)57

二、测定方法57

第十一节 乙酰胆碱酶酯(AChE,E.C.3.1.1.7)胆碱酯酶(ChE,E.C.3.1.1.8)58

一、一般性质58

二、测定方法58

第十二节5′-核苷酶(5′-NT,E.C.3.1.3.5)59

一、一般性质59

二、测定方法59

第十三节单胺氧化酶(MAO,E.C.1.4.3.4)59

一、一般性质59

二、测定方法59

第十五节精氨酰琥珀酸裂解酶(ASAL,E.C.4.3.2.1)60

二、测定方法60

一、一般性质60

第十四节醛缩酶(ALD,E.C.4.1.2.13)60

二、测定方法60

一、一般性质60

第五章酶法检测某些底物、辅酶等物质所用酶试剂及检测方法62

第一节概述62

第二节β-D-葡萄糖62

第三节尿酸63

第四节肌酸、肌酐63

第七节甘油三酯64

第六节胆固醇64

第五节氨64

第八节乙酰辅酶A65

第九节镁离子65

第六章同工酶66

第一节概论66

第二节同工酶的分类及命名66

一、同工酶的分类66

二、同工酶的命名68

第三节同工酶的生理意义及检测作用68

一、同工酶的生理意义68

二、同工酶检测的作用68

一、同工酶谱改变的类型70

第四节同工酶谱在癌瘤组织的变化70

二、癌瘤时同工酶谱改变的生物学意义71

第五节同工酶的鉴定72

一、电泳法72

二、层析法76

三、免疫学法76

四、动力学法77

第六节临床常用同工酶78

一、乳酸脱氢酶同工酶78

二、肌酸激酶同工酶82

三、谷草转氨酶同工酶84

四、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶同工酶87

五、γ-谷氨酰转换酶同工酶89

六、碱性磷酸酶同工酶91

七、酸性磷酸酶同工酶94

八、α-淀粉酶同工酶96

九、醛缩酶同工酶98

十、5′-核苷酸磷酸二酯酶同工酶100

十一、丙酮酸激酶同工酶100

第七章血清酶104

第一节血清酶的来源和去路104

一、血清酶的来源104

第二节血清酶的生理差异105

二、血清酶的去路105

一、性别106

二、年龄106

三、运动106

四、饮食106

五、妊娠106

第三节影响血清酶活力测定的因素106

一、溶血106

二、抗凝剂107

三、样品储存107

四、试剂和方法107

四、酶排泄障碍108

三、从血清中清除的速度108

二、从细胞释入血清的速度108

第四节疾病时血清酶活力改变的机理108

一、酶合成异常108

第五节血清酶活力测定的选择和评价109

一、灵敏度109

二、特异性109

第六节 同工酶谱分析在临床上的应用109

一、同工酶在诊断急性心肌梗塞中的应用109

二、同工酶在诊断肝胆疾病中的应用111

三、同工酶谱在癌瘤诊断中的应用113

第一节谷草转氨酶(GOT、AST)测定117

一、赖氏比色法117

第八章酶活力测定117

二、酶偶联测定法119

第二节谷丙转氨酶(GPT,ALT)测定120

一、赖氏比色法120

二、酶偶联测定法122

第三节碱性磷酸酶(ALP,AKP)测定124

一、磷酸苯二钠法124

二、对硝基酚法126

第四节酸性磷酸酶(ACP)测定128

一、磷酸苯二钠法128

二、磷酸麝香草酚肽法129

第五节肌酸激酶(CK)测定130

一、总活力测定130

二、同工酶测定134

一、总活力测定135

第六节葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6-PDH)测定135

二、同工酶测定138

第七节淀粉酶(AMY)测定139

第八节乳酸脱氢酶(LDH)测定140

一、总活力测定140

二、同工酶测定143

第九节α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定145

第十节γ-谷氨酰转移酶测定(r-GT)147

一、重氮试剂比色法147

二、对硝基苯胺法148

一、血清胆碱酯酶测定149

第十一节胆碱酯酶(CHE)测定149

二、全血胆碱酯酶测定151

第十二节5′-核苷酸酶(5′-NT)测定152

第十三节单胺氧化酶(MAO)测定154

第十四节醛缩酶(ALD)测定156

第十五节精氨酰琥珀酸裂解酶(ASAL)测定158

附录161

一、各种商品酶的稳定性161

二、各种体液酶的稳定性163

三、某些酶的米氏常数164

四、常用缓冲液168

五、层析法的数据173

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