《表1 RT-PCR引物序列》

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《miR-141-3p靶向调控DLC1对前列腺癌骨转移的作用》


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样本中总RNA的提取及real-time PCR Trizol法提取细胞中RNA,检测RNA纯度。根据反转录试剂盒(Takara)操作说明进行逆转录,将所得的cDNA加入75μl dd H2O稀释用作real-time PCR模板,real-time PCR的程序设置:94℃进行预变性2min,94℃15 s,60℃1 min,72℃10 min,共40个循环。在ABI 7500(Applied Biosystems)PCR仪上进行操作,使用2-ΔΔCt法计算miRNA相对表达量,qRT-PCR引物购自上海生工生物科技有限公司,引物序列见表1。