《表1 主要功能元件的引物信息》

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《转AM79-EPSPS基因抗草甘膦大豆遗传稳定性分析》

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取保存于-80℃的A6和A8转化体的T1和T2两个世代植株的苗期叶片组织，采用十六烷基三甲基溴化铵（hexadecyl trimethyl ammonium bromide，CTAB）法提取基因组DNA，利用PCR方法（反应体系和程序同上）对插入片段主要功能元件（包括启动子，目的基因，终止子）进行检测。表达载体中使用的启动子为CaMV 35S promotor，其长度为539bp，来源于花椰菜花叶病毒（Cauliflower mosaic virus），为组成型启动子。终止子为nos终止子（nos terminator，NT），长度为252 bp，来源于Ti质粒中胭脂碱合成酶基因的终止序列。利用Primer Premier5.0软件分别设计3对引物（表1），通过扩增外源T-DNA的片段，确定外源插入片段在不同世代转化体A6和A8基因组的整合稳定性。