《表1 DLC-1与Ezrin引物序列设计》

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《DLC-1和Ezrin与结肠癌术后复发的关联分析》

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qRT-PCR法检测结肠癌及癌旁正常组织中DLC-1与Ezrin的mRNA相对表达量。按照Trizol试剂盒说明书提取结肠癌及癌旁正常组织总RNA，参照反转录试剂盒说明书将RNA反转录为cDNA；按照SYBR Green RCR master mix试剂说明书检测DLC-1与Ezrin的mRNA相对表达量。PCR反应体系共20μL:SYBR Premix Ex TaqⅡ（2×）7.5μL，cDNA 2.0μL，正、反向引物各0.5μL，ddH2O 9.5μL。反应程序设定：95℃10 min，95℃30 s，60℃30 s，72℃30 s，共40个循环。引物设计见表1，DLC-1与Ezrin均以β-actin为内参。采用2-ΔΔCt相对定量法计算DLC-1、Ezrin的mRNA相对表达量。