《表1 p21 codon31基因引物序列》

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《p21 codon31基因多态性与宫颈癌的关系》


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取上述DNA模板进行限制性片段长度多态性分析(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)[9],PCR引物序列见表1。其中,PCR反应体系15μl,包括DNA模板1.0μl,p21正向引物(10μmol/L) 1.0μl,p21反向引物(10μmol/L) 1.0μl,dNTP(10 mmol/L)0.5μl,10×PCR缓冲液2.5μl,MgCl2(25 mmol/L)1μl,TaqDNA聚合酶(5 u/μl) 0.2μl,ddH2O 7.8μl。反应条件:94℃预变性5 min,94℃变性40 s,60℃退火30 s,72℃延伸40 s,共35个循环,72℃继续延伸10 min,取出4℃保存。