《表2 RT-PCR的引物序列》

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《兔髓核间充质干细胞与髓核细胞非接触式共培养的生物学效应》

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采用TRIZOL试剂，从细胞中提取RNA，-80℃保存。采用Promega公司的反转录试剂盒按说明书进行逆转录，在反应体系中加入4μg总RNA、随机引物（50 mmol/μl）2ul、ddH2O 32μl，70℃变性5min，置于冰上冷却。再加入M-MLV5×Buffer 10μl、dNTP（2.5 mmol/L）2μl、M-MLV（200 U/μl）2.5μl、Inhibitor（40 U/μl）1.5μl，37℃反应2 h合成cDNA，-20℃保存。在TP800荧光定量PCR仪上进行定量PCR。管家基因为β-actin，校正每个样品的Ct值。每一对引物在每一个模板中做3个实验重复，获得的Ct值取平均值。引物序列如表2。