《表2 RT-PCR引物序列》

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《利用cDNA-AFLP技术分析‘窄冠黑白杨’杂种优势的差异表达基因》

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为了验证c DNA-AFLP扩增图谱结果，以杨树TUB基因为内参基因，选取比对到的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶进行q RT-PCR分析，定量引物利用Primer Premier 5设计（表2）。分别提取杂种‘窄冠黑白杨’和父本窄冠白杨‘4号’芽、叶、茎三个不同组织的总RNA，反转录合成c DNA模板，利用One Step SYBR Prime Script RT-PCR Kit（Ta Ka Ra，大连)进行q RT-PCR分析。q RT-PCR反应体系为25μL:SYBR EX TaqTM II （2×）12.5μL，上下游引物(10μmol·L-1）各0.5μL，c DNA模板2μL，RNase Free dd H2O 8.5μL，反应程序参照说明书。反应结束后，利用2-ΔΔCT算法确定目标基因相对表达量。