《表1 RT-PCR引物序列》

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《肝癌组织中LIV-1基因mRNA的表达及意义》


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取液氮保存的组织标本100 mg于液氮中,加入1 ml Trizol研磨,按Trizol试剂使用说明提取总RNA,按反转录试剂盒使用说明将总RNA反转录为cDNA,随后进行PCR扩增。PCR反应条件为:94℃5 min,之后94℃30 s、58℃30 s、72℃30 s进行28个循环,最后72℃延伸7 min。以GAPDH为内参照,RT-PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳,出现目的大小的扩增条带者为表达阳性,用凝胶成像分析仪Genetools软件分析各扩增条带产物的灰度值,用LIV-1/GAPDH的比值表示LIV-1 mR-NA的相对表达水平。PCR引物由TaKaRa公司设计合成。