《表2 野生型和突变体M234Iβ-CGTase的纯化结果》

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《提高源自Bacillus circulans 251的β-CGTase对麦芽糖亲和性及其在生产海藻糖中的应用》

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粗酶液经30%的硫酸铵使得目的蛋白沉淀，8 000r/min离心20min，获取蛋白质沉淀。用磷酸二氢钠-磷酸二氢钾缓冲液（20mmol/L，pH 7.5）进行蛋白质沉淀复溶和透析，最后获得蛋白质样品。使用Mono Q阴离子交换柱对β-CGTase进行纯化，最后获得纯化样品。对样品进行SDS-PAGE，电泳图如图1所示，目的蛋白已达到电泳纯度。对每一步获得的样品进行蛋白质含量和酶活的测定，结果如表2所示。结果表明，重组β-CGTase的比活力（歧化活力）为357.63U/mg，突变体M234I则为345.25U/mg，突变后的酶比活力没有明显变化。