《表1 重组蛋白Tfu Dy P的飞行时间质谱分析》

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《褐色嗜热裂孢菌脱色过氧化物酶的表达及发酵条件优化》

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注:DYP THEFY；MASS:45957；Score:432；Matches:6（5）；Sequences:6（6）Dye-decolorizing peroxidase Tfu＿3078 OS=Thermobifida fusca（strainYX）GN=Tfu＿3078 PE=1 SV=1。

将含有全长1 293 bp的目的基因的pET28a（+）-Tfu DyP和空载pET28a（+）质粒分别转化至E.coli BL21中进行异源表达。收集菌体、破碎、离心、分离纯化，将粗酶液和纯化后蛋白进行SDS-PAGE电泳确定目的蛋白表达情况。结果如图2，有明显的目的蛋白条带，分子质量约为46 kDa，与理论计算值一致。将目标条带割胶回收，进行MALDI-TOF质谱分析[18]，检测数据库为SwissProt 201704（554241 sequences；198410167 residues），与库中理论质量为45 957 Da的dye-decolorizing peroxidase Tfu＿3078 OS=Thermobifida fusca匹配，匹配分数为432（表1），确定重组TfuDyP在E.coli BL21成功表达。