《表1 壳寡糖制备方法的优缺点》

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《壳寡糖的制备及生物学活性研究进展》

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利用酶对CTS进行降解的方法，主要分为专一性酶（甲壳素酶和壳聚糖酶）与非专一性酶（脂肪酶、果胶酶与纤维素酶等）降解。Dong等[14]比较了六种非特异性酶降解CTS的活性，发现纤维素酶水解能力最强。进一步实验发现，在pH5.3、45oC条件下用120 U/g纤维素酶和75 U/g壳聚糖酶共同降解CTS 6 h后，聚合度为6～8的COS产量占产物总量的79.8%[14]。琚洋洋[15]在不同的条件下用壳聚糖酶制备COS：温度为50oC、pH5.6、底物浓度为3.0%、加酶量58 U/g、反应4 h，此时，3，5二硝基水杨酸比色法测得COS的含量为96.5%；通过高效液相色谱法定量表明，壳三糖和壳四糖含量分别占40.42%和33.04%。此外，李汶潓等[16]实验发现，经壳聚糖酶降解CTS的产物还具有较好的清除DPPH自由基的活性，并用响应面分析法优化了壳聚糖酶降解CTS的工艺：CTS浓度为0.2 g/L、反应温度为54oC、pH4.6、酶底比为36%、反应时间64 min。在此条件下，降解产物对DPPH自由基的清除能力达92.60%，其中，最主要影响产物清除自由基能力的因素是反应体系的pH和温度[16]。与化学法相比，酶法反应条件温和，不需要化学药品产生大量废液，节能、高效并无污染，是目前制备COS使用最多的方法之一。以上各种COS制备方法的优缺点见表1。