《表1 引物及核苷酸序列》

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《枯草芽孢杆菌中一种新型双向启动子的功能鉴定》

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分别通过引物pLA-F/pLA-Alk-R和pLB-F/pLB-Alk-R（表1），以该地衣芽孢杆菌基因组为模板，PCR获得大小为137 bp的pLA和pLB片段。PCR反应体系为：ddH2O 33.8μL，基因组模板2μL，上游引物和下游引物各2μL，10×Pyrobest缓冲液5μL，dNTP Mixture（2.5 mmol/L）5μL，Pyrobest DNA聚合酶0.2μL。PCR反应条件为：95℃预变性5 min；95℃变性30 s，51℃退火30 s，72℃延伸8 s，共30个循环；72℃延伸10 min。0.8%琼脂糖凝胶电泳检测，胶回收分离纯化PCR产物。