《表1 RT-PCR引物序列》

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《白细胞介素-1β和电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响》


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用成骨诱导培养基培养3 d后,每孔加入1 ml Trizol提取总RNA,按照逆转录试剂盒说明书操作,将mRNA逆转录成cDNA,应用SYBR Green荧光染料技术行荧光定量PCR,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、OPN、Runx2的基因表达。相关指标的引物设计见表1。反应条件:95℃变性5 s,55℃退火15 s,72℃延伸10 s,一共40个循环。用同样方法分析经过7 d培养刺激后ALP、OPN、Runx2的mRNA基因表达。用2-△△CT法进行相对定量计算。