《表1 α-淀粉酶基因序列获得及外显子区域SNP位点筛选所用引物》

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《缢蛏α-淀粉酶基因外显子区域SNPs筛选及其与生长性状关联性》

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根据GenBank中已登录的缢蛏α-淀粉酶基因c DNA序列（KX197931.1）同时参照同源性最高的（71%）河蚬α-淀粉酶基因组序列（AF468016.2），利用Primer 5.0设计特异性引物AMY F1/AMY R1、AMY F2/AMY R2、AMY F3/AMY R3、AMY F4/AMY R4（表1）对缢蛏α-淀粉酶基因内含子区域进行扩增，PCR反应体系为:2×Taq PCR master mix 10μL，上下游引物（10μM）各0.6μL，DNA模版0.8μL，加ddH2O补足20μL。PCR扩增程序为:94℃5 min，94℃30 s，50℃30 s/60℃30 s/60℃30 s/50℃30s，72℃1～3 min，35个循环；72℃10 min。扩增产物经过1%琼脂糖凝胶电泳验证，然后按照SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒说明书进行纯化，将回收的产物与p MD18-LT载体连接，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞后，菌落PCR筛选阳性克隆送上海生工生物工程有限公司测序。