《表1 ARIX基因、TUBB2b基因、TUBB3基因外显子引物序列》
设计引物分别扩增ARIX基因、TUBB2b基因及TUBB3基因外显子区域。引物由生工生物工程(上海)有限公司合成,PCR扩增引物见表1。PCR扩增反应体系为20μL,包括1μL模板DNA(10~60ng/μL),10μL Takara 2×PCR Premix(RR003A),1μL引物(2.5pmol/μL),9μL ddH2O。使用ABI公司的9700PCR仪进行PCR反应。ARIX基因反应程序:95℃5min,(94℃45s,59℃45s,72℃45s) ×40个循环,72℃10min终止反应。TUBB2b基因反应程序:95℃5min,(94℃30s,60℃45s,72℃30s) ×40个循环,72℃10min终止反应。TUBB3基因反应程序:95℃5min,(94℃30s,62℃30s,72℃30s) ×40个循环,72℃10min终止反应。PCR产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定条带均单一。扩增产物按照PCR产物回收试剂盒(OMEGA D2500-01)说明书的操作步骤进行回收纯化。
图表编号 | XD0029261700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.02.14 |
作者 | 李永蓉、王慧 |
绘制单位 | 安徽省合肥市第二人民医院眼科、安徽省合肥市第二人民医院眼科 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |