《表1 本试验中演化型特异性多重PCR鉴定的引物序列 (Fegan&Prior, 2005)》

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《我国长江流域和南方地区花生青枯菌遗传多样性分析》

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采用CTAB法（Pastrik&Maiss，2000）分别提取供试菌株的基因组DNA，参考Fegan&Prior（2005）方法合成青枯菌演化型特异性多重PCR引物（表1）。采用多重PCR方法对来自全国9个花生种植区的95株青枯菌进行PCR扩增。10μL反应体系:2×Taq Mix 5μL、7个引物各0.5μL（引物Nmult-21:1F、Nmult21:2F、Nmult22:RR的浓度均为7μmol/L，引物Nmult22:InF、AU759f、AU760r的浓度均为10μmol/L，引物Nmult23:AF的浓度为18μmol/L）、25 ng/μL DNA模板1.5μL。扩增程序为:96℃预变性5 min；94℃变性15 s，59℃退火30 s，72℃延伸30 s，30个循环；最后72℃延伸10 min。PCR产物利用2%琼脂糖凝胶进行电泳检测，DNA Marker为DS2000。