《表1 Real-time PCR引物信息》

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《番茄OSCA基因家族鉴定及不同胁迫条件下表达分析》


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利用Trizol试剂(Invitrogen)提取高质量RNA,RNA逆转录试剂盒(东洋纺)逆转录,其他试剂均为国产分析纯。Real-time PCR荧光染料试剂盒为Gene Copoeia All-in-OneTMqPCR Mix,仪器为qTOWER3G(耶拿,德国)。设置PCR程序为:95℃10 min;95℃10 s,58℃20 s,72℃15 s,共40个循环;溶解曲线分析采用72~95℃,每个循环缓慢升温0.5℃。数据采用2-??CT方法计算分析,以actin内参基因作为对照,与对照(对照组0 h定义为1)相比并计算。误差线代表3次独立生物学重复标准偏差,显著性分析采用ANOVA。反应所需引物如表1所示,每个样品3次重复。