《表1 Real-time PCR引物》

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《肝癌组织中PD-L1和HIF-1α的相关性研究》

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将肝癌细胞Huh7和Hep3B细胞分别接种于六孔板中，待细胞长至70%融合时，对照组加入DMSO，实验组加入50μmol/L的YC-1，作用48 h后按Trizol说明书分别提取总RNA并测浓度、纯度。取等量RNA逆转录为cDNA，遵循SYBR?Green PCR Master Mix（2×）的操作说明书，进行定量PCR反应。该反应总反应体系为20μL，其中cDNA模板2μL，上下游引物各0.2μL，sybrGreen Mix 10μL，ddH2O 7.6μL。以β-actin做为内参基因。表1为反应所用引物。