《表1 Real-time PCR引物》

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《瑞舒伐他汀预处理对缺血再灌注大鼠大脑中动脉血管平滑肌细胞炎症因子的影响及其机制》

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大鼠大脑中动脉平滑肌细胞悬液，4000 r/min离心5 min，弃上清，按试剂盒（FastStart Universal SYBR Green Master，Roche公司）说明书进行操作，使用Trizol Reagent（Invitrogen Life Technologies公司）提取各组总RNA。用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测其完整性和RNA的吸光度（absorbance，A）260、A280，分析A260/A280比值判断RNA纯度。按照RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit（Thermo公司）操作步骤，将各组mRNA反转录为cDNA。引物由Invitrogen Biotechnology公司，LTD中国公司合成，按照合成单加入ddH2O，制成7.5μmol/L溶液，序列见表1。PCR扩增条件:95℃预变性10 min，95℃15 s，60℃60 s，共计40个循环，75℃→95℃，每20 s升温1℃。使用7300 Real-time PCR系统自带分析软件对Real-time PCR结果进行分析。