《表1 RT-PCR所用引物》

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《核盘菌几丁质酶基因家族分析与表达特性研究》

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用TRIzol试剂按说明书分别提取和萌发形成子囊柄的菌核总RNA，并用DNAse处理总RNA.用ReventAidTM First Strand cDNA Synthesis Kit反转录试剂盒合成cDNA第一链.以合成的cDNA为模板，进行RT-PCR扩增，使用仪器为CFX96TM Realtime System（Bio-Rad，Hercules，CA，USA）.反应体系为2×SYBR Green Real time PCR Master Mix:10μL，正/反向引物各0.2μmol/L，cDNA模板:40ng，总体积:20μL.反应程序为95℃，2min（1cycle）；95℃20sec，56℃15sec，72℃20sec（40cycles）.荧光读数设在56℃.以核盘菌Beta-tubulin基因（tub1，SS1G_04652）为内参进行基因表达分析，实验重复3次，利用Excel软件进行数据统计分析.RT-PCR引物（表1）由生工生物工程股份有限公司合成.