《表1 RT-PCR所用引物》

《表1 RT-PCR所用引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《T140阻断SDF-1/CXCR4信号通路并在骨关节炎疾病模型中防止软骨退化》


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用RNeasy分离试剂盒(赛默飞世尔科技(中国)有限公司)从膝关节胫骨的软骨组织分离总RNA,用分光光度计评估提取的RNA的量和纯度。根据RevertAidTM将1μg总RNA转录成cDNA将第一链cDNA合成试剂盒说明书(赛默飞世尔科技(中国)有限公司)和40 ng/μL获得的c DNA用作PCR扩增的模板,以使用LightCycler480 SYBR GreenⅠMaster(Roche)定量每种mRNA的相对含量,β-肌动蛋白用作内部参考。由OMIGA v2.0(Genetics computer group,madison,USA)设计的β-肌动蛋白、MMP-3、MMP-9、MMP-13、ACAN和ColⅡ的引物用于扩增各种编码序列中包含的产物的RNA。引物序列(表1),数据作为阈值循环(Ct)给出。基因表达的倍数变化计算为2-ΔΔCt。