《表1 MSAP接头：运用MSAP技术测定谷子基因组DNA胞嘧啶甲基化水平》

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《运用MSAP技术测定谷子基因组DNA胞嘧啶甲基化水平》

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分别用Eco RⅠ/HpaⅡ、Eco RⅠ/MspⅠ组合对基因组DNA进行酶切，连接接头（表1），实验所用酶购买自NEB公司，所用引物序列由生工生物工程（上海）股份有限公司合成（表2）。每对引物进行5%的聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染后对清晰可辨、可重复的带型进行记录，并对其位点进行MSAP分析。实验根据泳道内有无条带，将清晰可重复的条带记为“1”，同一位置没有条带记为“0”。统计每对引物扩增出的总条带数和其中的甲基化条带数，每个引物组合做3次重复。