《表1 RT-PCR引物信息》

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《一起奶牛腹泻病的病原学诊断》

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参照文献[1-6]中有关BRV、BCoV、BVDV、Salmonella、ETEC及C.andersoni的检测方法，对18份犊牛腹泻样本的cDNA和DNA模板进行PCR扩增，检测引物见表1，由生物工程（上海）股份有限公司合成。25μL反应体系如下:2×Taq PCR Master Mix 12.5μL，上、下游引物各1.5μL，扩增样本cDNA或DNA 2μL，ddH2O7.5μL。PCR扩增条件为:94℃4 min，94℃30 s，52～55℃30 s，72℃30 s，72℃5 min，30个循环。取扩增产物经2%琼脂糖凝胶核酸电泳后，用凝胶成像系统进行检测。将阳性PCR产物送至生物工程（上海）股份有限公司测序，测序结果经BLAST比对。